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    細胞爬片的免疫組化步驟

    來源:admin  瀏覽量:  更新時間:2016-10-31 22:40:25

    1、調整好細胞濃度后制成細胞涂片,4%多聚甲醛固定10-20min;

    2、0.01M PBS充分沖洗2minX3;

    3、0.5% Triton100處理20min;

    4、3%甲醇-H2O2室溫孵育20min,0.01M PBS沖洗 5minX3(輕輕振蕩);

    5、滴加30ul/片羊血清封閉液,室溫30min后傾去,

    6、滴加1100稀釋的一抗30ul/片(0.01M PBS稀釋),置濕盒內4℃過夜,0.01M PBS洗(5min×3),

    7、加辣根過氧化物酶標記的二抗30ul/片,37℃孵育30min,0.01M PBS洗(5min×3),

    9、DAB顯色,鏡下觀察顯色后充分水洗,

    10、蘇木精復染,自來水沖洗;

    11、常規脫水、透明、中性樹膠封片。

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