來源:admin 瀏覽量: 更新時間:2021-05-19 16:47:22
細胞水平驗證突變對mRNA剪接的影響
您手中是否存有患者的基因突變但無法進行致病性評級,使您的診斷或研究暫停?
您是否考慮過該突變會影響基因mRNA的正常剪接,進而影響基因的功能?
您是否正在為無法或難于再次采集患者的樣品進行RNA轉錄分析而苦惱?
您是否正在為突變基因在血液中無表達或表達過低而煩惱?
只需要患者基因突變信息,minigene技術就能幫您解決上述問題!
l 服務概述
mRNA前體的正確剪接是真核生物基因表達的關鍵步驟,其剪接異常將會影響基因表達量或功能的異常。minigene技術又稱為mRNA異常剪接體外驗證實驗,是一項針對突變位點是否影響mRNA剪接的細胞水平驗證實驗。通過克隆帶有變異位點(包括剪切位點附近以及深度內含子中的點突變、插入及缺失等變異類型)的目標基因組片段,構建重組表達載體,轉染細胞株后進行RNA抽提及cDNA反轉,再利用電泳和測序技術驗證該突變對mRNA剪接的影響(外顯子缺失、內含子滯留)。
l 服務特點
(1)根據突變所在位置,結合生物信息學的方法,幫助客戶預測得到陽性結果(即突變會影響剪切)的可能性,并設計整套優化實驗方案;
(2)根據客戶需求、疾病特點等因素,選取兩種(或以上)不同的真核表達載體以及兩種(或以上)不同組織來源的細胞系進行mRNA剪接驗證,提高獲得陽性結果的可能。
l 服務內容
l 客戶提供
客戶需提供突變檢測報告及純度質量合格的突變位點攜帶者(純和、雜合均可)及正常人的基因組DNA,低溫寄送。
l 交付結果
(1)構建的載體
(2)服務報告:內容包括生物信息學預測結果、minigene構建策略示意圖、重組載體酶切及測序結果、minigene剪接結果電泳圖及測序結果等。
l 聯系我們
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