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    shRNA慢病毒細胞株構建

    來源:admin  瀏覽量:  更新時間:2016-10-20 09:08:17

    siRNA和shRNA載體

    在目前的研究中,實驗基因表達水平的敲低主要是通過轉染siRNA或者shRNA載體來實現的。

    siRNA(Small interfering RNA)是一種21-25核苷酸的小分子RNA,由Dicer(RNAaseⅢ家族中對雙鏈RNA具有特異性的酶)加工而成。SiRNA是siRISC的主要成員,激發與之互補的目標mRNA的沉默。由于有些類型細胞脂質體效果差,轉移到細胞內的siRNA半衰期短,體外合成siRNA對基因表達的抑制作用通常是短暫的,因而使其應用受到較大的限制。

    shRNA載體可以將siRNA把位點克隆到載體上,然后轉移到細胞內轉錄形成siRNA,其對基因表達抑制的效果也不遜色于體外合成siRNA,在長期穩定表達載體的細胞中,甚至可以發揮長期阻斷基因表達的作用。


    shRNA慢病毒包裝

    百翼生物實驗室提供帶PURO篩選標記和GFP/PURO雙篩選標記的shRNA載體,將目標靶點克隆到shRNA載體,然后通過轉染獲得慢病毒毒液。


    shRNA慢病毒感染及穩轉株篩選

    使用慢病毒毒液感染目標細胞,然后通過篩選標記進行篩選,挑取單克隆恢復培養成細胞系(貼壁細胞),最終獲得穩轉細胞系。

     

    服務價格



    客戶提供:

    1、目標基因的基因號及shRNA靶點序列;

    2、如客戶不能提供明確的靶點序列,本實驗室可免費設計3條靶點進行驗證;靶點敲低效率驗證試驗需另行收費。


    實驗結果:

    1、包裝的毒液或穩轉細胞株;

    2、操作手冊一份;

    3、引物序列、載體圖譜、測序報告;

    4、詳細的項目報告。

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    電話:027-87003398

    客服QQ:1968663631

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